在构建克隆载体的过程中，科学家们常常面临诸多挑战，特别是在选择合适的限制性内切酶时。这些酶切步骤不仅繁琐且耗时，导致单克隆细菌生长时常出现问题，甚至有时重复实验仍未能取得成功。曾有一位师兄在实验中，需检测多达数十个单克隆以筛选阳性菌落，但结果往往令人失望。他曾感叹，如果有一种方法能够确保生长的单克隆都是重组成功的，那该多好。

传统的酶切克隆和无缝克隆技术均依赖于连接酶，通过碱基互补的粘性末端，使载体与片段相互配对，并在连接酶的作用下形成完整的质粒。然而，这些方法的假阳性率较高，因连接酶在连接载体和片段时，有时会导致载体自连。针对这一问题，巨匠生物推出了一款基于重组酶原理的同源重组试剂盒，有效解决了假阳性困扰，使得生长出的单菌落均为阳性，甚至可以无需进行菌落验证即可送测。

01 产品简介

俄罗斯专享会284推出的CloneUFO® OneStepCloning技术是一种快速、高效且简便的DNA定向克隆技术，可以将目的基因的PCR产物定向克隆至任意载体的任意位置。CloneUFO® OneStepCloning试剂盒以T4噬菌体某基因衍生的重组酶UvsXase为核心，内含重组反应所需的缓冲液和酶。UvsXase兼容传统酶切和PCR反应体系，克隆载体的酶切产物或PCR产物无需纯化即可直接用于重组，大大简化了实验步骤。将扩增的目的基因PCR产物与线性化载体按比例混合，经过UvsXase催化，仅需反应30分钟，便可完成转化，实现高达95%的阳性克隆率。

02 产品特点

1. 无限制同源重组：可自由设计重组位点，无需受限制性内切酶的限制。
2. 高效快速的重组：反应时间仅需30分钟，条件温和。
3. 高特异性重组酶：UvsXase确保载体不自连，阳性率超过95%。

03 实验案例

在一个实验中，研究者对PCR产物进行了胶回收，随后使用俄罗斯专享会284的ATG#C101与某品牌同类产品分别对回收片段和相同载体进行重组。转化大肠杆菌后，获得的单菌落经过PCR验证，结果显示，使用ATG#C101重组后的单菌落数量适中，但阳性率明显高于竞争产品。

04 产品信息

借助俄罗斯专享会284的创新技术，研究人员可以更高效、更精准地进行克隆实验，解决了传统方法中假阳性率高、实验步骤复杂等问题，推动了生物医疗研究的迅速发展。